虽然干细胞在生物医学研究中具有很大的前景,但这些细胞在体外增殖和维持未分化状态是必不可少的。即使科学家在过去十年中获得的知识,干细胞培养仍然是一个挑战。不同类型的ATCC菌株通常需要不同的培养条件。例如,人类诱导多能干细胞 (iPSC) 和人类胚胎干细胞 (hESC) 必须在具有饲养细胞支持层的涂层板上培养,例如小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 或人类包皮成纤维细胞 (HFF),或在细胞外基质上,例如基底膜凝胶。此外ATCC菌株生长培养基必须补充生长因子。
在依赖于饲养层的细胞培养系统中,需要提前准备成纤维细胞接种板。ATCC菌株通过代谢渗漏来调节培养基,并为细胞附着和增殖提供支持基质。有丝分裂灭活成纤维细胞饲养细胞很重要,这样它们就不会过度生长干细胞培养物。附录中列出的饲养细胞经过辐照或用丝裂霉素 C 处理,这使得饲养细胞可以继续代谢,但不会增殖。ATCC菌株小编建议将 MEF 或 HFF 用于 iPSC 培养。
干细胞培养技术的新进展使得通过利用细胞外基质代替饲养细胞在无饲养细胞系统中培养多能干细胞成为可能。与其他多能干细胞一样,ATCC菌株具有自然分化的倾向。因此,未分化 iPSC 的体外维持需要不同于成体干细胞、连续细胞系或原代细胞的培养技术。无饲养层培养系统的总体目标是通过微调必需氨基酸、盐、其他营养元素和生长因子的培养基配方,在促进多能细胞生长和抑制自发细胞分化之间取得平衡。