1、 未开封时,冷藏于≤8℃(≤46℉),并在保存期内用完,高温度时,凝固水可以排除,包装物最好于室温启开。
2、 已开封的,将封口以胶带封紧。
3、 保存再封的袋于≤25℃(≤77℉)和温度<50%,不要冷藏已开启的包装袋,并于一个月内使用完。
4、 制备1:10和更大稀释的食物样品稀释液,称取或吸取食物样品,置入适宜的无菌容器内,如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag或者其他灭菌容器内。
5、 加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的旦白胶水(ISO方法6887) 、缓冲旦白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水。不可使用含有枸橼酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液,因为它们能抑止菌生长。
6、 搅拌或均质样品.样品不需要调PH,但已调解PH的样品也能够使用。
7、 将测试片置于平坦表面处,揭开上层膜。
8、 使用吸管将1ml样液垂直滴加在测试片的中央处。
9、 允许使上层膜直接落下,切勿向下滚动上层膜.
10、 手拿压板横膜,将压板放置在上层膜中央处.
11、 平稳的压下,使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上,切勿扭转压板。
12、 拿起压板,静置至少1分钟以使培养基凝固。
13、 测试片的透明面朝上,可堆叠至20片,于21-25℃(70-77℉)培养3-5天。
大的或快速生长的霉菌在培养5天后会呈现含混模糊的菌落,应在培养3天后记录高数量计数结果。
如果培养5天后,测试片上菌落丛生过快的生长,则以3天计数结果作为估计菌落数。培养时间和温度因方法而有不同,最通用的认可方法是:
AOAC官方方法997.02(食品类) 21-25℃培养5天。
14、可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计数,并可参考判读卡计算菌落数。