3M检测片操作
1.固体
以无菌操作将25 g样品加入到225 mL的稀释液(磷酸盐缓冲液或0.1%蛋白胨水)中,8000 r/min均质2 min (或放入无菌均质袋中,用均质器拍打2min),制成1 :10样品匀液。
2.液体
取25 mL样品原液,放入装有225 mL,稀释液的无菌玻璃瓶中,以30 cm幅度, 7s内振摇25次,制成1 : 10样品匀液。
将上述匀液做10倍系列梯度稀释,根据样品的污染程度,选择适宜的2个-3个连续稀释度,每个稀释度接种2张测试片。
将PYM检验测试片放在平坦的实验台上,揭开上层膜,用移液器将1 ml样液加到测试片的中央,轻轻覆盖上层膜,用压板平稳压下,使其均匀覆盖在测试片的圆形培养面积上,拿起压板,静置至少1 min,使培养基凝固。
将测试片的透明面朝上放置于培养箱内,堆叠不能超过20片,在25℃-28 ℃下培养3d-5d。
3.判读
培养3d后观察计数,如果5d后,测试片上的菌生长过快,出现边缘模糊的菌落,就用3d的计数结果作为估计菌落数。
在PYM测试片上,颜色均匀一致,灰白色到蓝绿色或粉红色,没有暗色中心,边界明显的小型隆起菌落计为酵母菌。颜色多样(棕色、米色、橙色、蓝绿色等)、中心颜色深暗的大型或小型扁平扩散菌落计为霉菌。3M检测片厂家期待您的来电!