细菌在我们生活中到处都存在,细菌的种类也是非常的多,好的细菌对我们会有很多好处,但是坏的细菌会给我们的身体带来很大的影响.所以一些专家都会对细菌进行检测,检测细菌是非常麻烦的,下面ATCC菌株小编就跟大家具体讲讲检测菌株数量的方法.
1、方法
生活饮用水:直接倾皿培养
水源水:稀释后,再倾皿培养(每个稀释度倒两个培养皿)
取1ml于灭菌的培养皿中,加入15ml左右已熔化、约45℃的营养琼脂培养基,左右旋转(轻轻)均匀,37℃、24h.
2、菌落计数
一般先进行肉眼观察,钢笔或蜡笔点数放大镜检查有无遗漏的小菌落
3、计数方法
1)平板菌落数的选择
2个平行培养皿,以无片状菌落生长的平板作为计数
2)稀释度的选择
选取平均菌落数在30~300之间的稀释度
若有2个平行培养皿的菌落数均在30~300之间,视二者之比决定N1/N2
N1/N2>2,报告其中较小的数字
注:N1、N2为计算后的细菌总数均>300,按稀释倍数最高者×稀释倍数均300或
3)菌落数报告格式
100以内,以实有数报告大于100时,取2位有效数字,其后的数字以"四舍五入"计算,为缩短数字后的"0"数,可用10的指数表示.
4、注意事项
1)所用器皿均完全灭菌,避免二次污染.
2)稀释的液体,应有空白对照.
3)应以dw或生理盐水、PBS,用0.1%的蛋白胨水为适.
4)稀释水样时,吸管应插入液体内部,不得低于液面2.5cm.吸入时,应先高于吸管高度,提取离开液面,紧贴管内壁放到所需位置.
