大家就知道CMCC与ATCC菌种是什么吗?对CMCC与ATCC菌种有什么了解吗?CMCC与ATCC分别是中国医学微生物菌种保藏管理中心和美国典型菌种保藏中心的缩写,那么这两个同为菌种它们有什么区别吗?下面我们就一起来看看它们的不同之处以及复溶的方法.
实验原理小鼠骨髓细胞有高度的分裂活性,并且数量非常多,因此不必进行体外培养,可直接观察到分裂期细胞.
处于分裂期的细胞经秋水仙素处理,阻断纺锤丝的形成,使细胞分裂停止于中期,此时染色体达到最大收缩,具有典型的形态.低渗处理使细胞破裂,便于染色体分散.
ATCC和CMCC的菌种的区别跟联系?
CMCC是中国医学微生物菌种保藏管理中心的缩写,ATCC是美国典型菌种保藏中心的缩写.
由于菌种保藏单位不同,他们所收藏的菌株也会不同,所以两种菌是无法用同一名称统一起来的.做分子生物和微生物实验有时可以不考虑两者的区别,只要该菌能满足实验需要,但做检验就必须按什么标准就用什么菌株.
ATCC菌株用什么复溶
用培养基可能会造成不必要的干扰,有什么缓冲液可以代替或是用生理盐水吗?购买的ATCC标准株一般都是细菌的液体培养物经低温真空冻干,可在培养物中加入几滴该菌的液体培养基,混均后接种到固体平板或液体培养基中.
菌种到底是个什么东西呀?相信大家应该都没有听说过,或许极少数人会知道,那么菌种是如何培养出来的想必大家都不是很清楚,它的培养条件又是怎样的呢?为了帮助大家能更好的了解菌种,下面就为大家讲讲菌种的培养条件.
1.培养条件和菌龄实践证明,采用最适培养基和最适保藏温度进行保藏,可提高微生物的存活率,延长菌种保藏期.研究表明,处于稳定期的细胞或成熟的孢子对不良环境具有较强的抗性,因而,保藏非芽胞细菌和酵母菌,应采用对数末期或稳定初期的细胞.而保藏芽胞细菌、放线菌和霉菌,要用成熟的孢子.
2.菌种悬液的浓度为了保证菌种保藏期间具有一定的存活细胞,往往将保藏微生物的细胞浓度增大.一般要求细菌细胞和放线菌孢子的浓度?108/ml,酵母菌细胞和霉菌孢子的浓度>107/ml.液氮超低温冷冻、真空干燥和真空冷冻干燥过程中,高浓度细胞可降低每个细胞暴露在介质中的面积,从而增强了抗冷冻和抗干燥的能力,提高了细胞的存活率.
3.保护剂采用液氮超低温冷冻、真空干燥和真空冷冻干燥保藏菌种,保护剂的选择是提高微生物冷冻或干燥存活率,延长菌种保藏期的关键因素.保护剂分为低分子保护剂(低聚糖类、醇类、缓冲盐类、氨基酸和维生素类)和大分子保护剂(蛋白质和多肽类、多糖类).不同微生物菌种所适宜的保护剂不同,必须通过试验筛选而确定.
4.冻结速度在液氮法和冻干法保藏菌种的过程中,冻结速度是影响微生物存活率的重要因素.研究表明,真核微生物菌种适宜慢速冻结,而原核微生物菌种经慢速冻结和快速冻结后,细胞存活率差异不显著.我国菌种保藏一般采用三种方法:斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、冷冻干燥保藏法.对放线菌还另有沙土管保藏法,对丝状真菌另加麸皮保藏法.国际著名的美国典型菌种保藏中心(ATCC),采取两种最有效的保藏方法,即保藏期一般达5--15年的冷冻干燥保藏法和保藏期一般达20年以上的液氮保藏法,以达到最大限度减少传代次数,避免菌种退化.当菌种保藏机构收到合适菌种时,先将原种制成若干液氮保藏管作为保藏菌种,然后再制成一批冷冻干燥管作为分发用.经5年后,若第一代(原种)的冷冻干燥保藏菌种已分发完毕,就再打开一瓶液氮保藏原种制成一批冷冻干燥管作为分发用.这样,至少在20年内,凡获得该菌种的用户,至少只是原种的第二代,可以保证所保藏的分发菌种的原有性状.
5.保藏条件根据菌种保藏的目的和原理,尽量采取低温、干燥、避光和真空密封等综合技术措施和条件保藏菌种,以利于菌种保藏期的延长.
6.恢复培养处于液氮冷冻状态的菌种恢复培养时,通常采用38℃--40℃快速升温解冻,因为慢速升温解冻有可能出现胞内再结冰,造成胞内冰晶增大而伤害细胞.
